Steriliseringseffektivitetsverifiering av autoklaver

Ett av de mest väsentliga instrumenten i ett mikrobiologilaboratorium är sterilisatorn, med autoklaven (högtrycksångsterilisator) som den mest använda. Enligt GB 4789.1-2016 bör laboratorieutrustning regelbundet inspekteras och/eller kalibreras (med inspektionstaggar), underhållas och servas för att säkerställa korrekt prestanda och driftssäkerhet. Men har din autoklav genomgått sådana inspektioner? Och om du vill utföra verifiering, hur ska du göra det? Idag sammanfattar vi de viktigaste metoderna för att verifiera steriliseringseffektiviteten hos autoklaver.

Verifiering av autoklavsteriliseringseffektivitet inkluderar i allmänhet metoder såsom kemisk indikator, maximal termometer, självgjord temperaturrör och biologisk indikator. Även om dessa metoder delar liknande principer - som inte bekräftar om sterilisatorn når den erforderliga temperaturen under sterilisering - kan du välja en eller flera baserat på ditt labs specifika förhållanden.

1. Kemisk indikatormetod

Princip: Kemiska indikatorer genomgår en färg- eller formförändring under specifika temperatur- och tidsförhållanden. Denna förändring används för att bestämma om steriliseringsparametrarna har uppfyllts.

Ett vanligt använt objekt i laboratorier är 3M autoklavindikatortejp, som ändrar färg efter sterilisering. Tejpen är tillverkad av termosensitiva kemikalier, färgutvecklare och färgmaterial, tryckta i ett randmönster på självhäftande tejp. Det appliceras direkt på utsidan av steriliseringspaketet, med en minsta längd på 5 cm. Tryck lätt på tejpen för att säkerställa god vidhäftning och tätning. Efter att ha blivit utsatt för 121 ° C i 20 minuter eller 130 ° C i 4 minuter, bör de diagonala vita ränderna på bandet bli helt svart. Om färgförändringen är ojämn eller ofullständig anses paketet inte vara ordentligt steriliserat.

2. Maximal termometermetod

Princip: Denna metod använder en kvicksilvertermometer som inte återgår till en lägre temperatur när den är uppvärmd, liknande en traditionell medicinsk termometer. Det indikerar den maximala temperaturen som uppnåtts under sterilisering.

För verifiering, placera kvicksilvertermometern i en vattenfylld Erlenmeyer-kolv. Under sterilisering, placera kolven vid de övre och nedre delarna av autoklaven. Kontrollera om termometerns avläsning matchar den erforderliga temperaturen. Denna metod kan endast verifiera temperaturen och kan inte bekräfta om steriliseringstidskravet uppfylldes, så den representerar minimistandarden för autoklavverifiering.

3. Självgjord temperaturrörsmetod

Princip: Denna metod använder vissa kemikalier som smälter och omkristalliserar vid specifika temperaturer, med distinkta kristallformer efter kylning. Dessa kemikalier är förseglade i små glasrör och placeras i autoklaven. Efter sterilisering undersöks kristallformen för att bestämma om rätt temperatur uppnåddes.

Bensoesyra används vanligtvis, med en smältpunkt på 121–123 ° C, som anpassar sig till autoklavens standardsteriliseringstemperatur. Fast bensoesyra förseglas i små glasrör och placeras i autoklaven. Efter sterilisering observeras tillståndet för bensoesyran för att bekräfta om måltemperaturen uppnåddes. Liksom den maximala termometermetoden, verifierar detta tillvägagångssätt endast temperaturen, inte steriliseringstiden.

4. Biologisk indikatormetod

Princip: Denna metod använder icke-patogena sporer av Geobacillus Stearothermophilus som indikatororganismer för att bedöma effektiviteten av termisk sterilisering. Dessa sporer är mycket värmebeständiga, med resistens som liknar den för patogena Clostridium botulinum-sporer, vilket gör dem lämpliga indikatorer för att verifiera steriliseringseffektivitet.

Biologiska indikatorer finns i tre former: sporeuspensioner, sporremsor och integrerade spore-och-mediumrör. Dessa placeras vanligtvis på fem platser i steriliseringsbehållaren: den främre, mitten och baksidan av det nedre skiktet, såväl som mittpunkterna för de övre och mellersta skikten. Efter sterilisering ympas indikatorerna i bromokresol lila-glukos-peptonvatten och inkuberas vid 55–60 ° C under 2–7 dagar. Om mediet förblir klart och oförändrat i färg dödades sporerna, vilket indikerar god sterilisering. Om mediet blir gult och grumligt, överlevde sporerna, vilket tyder på dålig steriliseringsprestanda. Både spore -suspensioner och sporremsor följer samma valideringsprocess.

Kommersiella biologiska indikatorrör används också ofta i laboratorier. De innehåller Geobacillus Stearothermophilus -sporer och en förseglad glas ampull med tillväxtmedium. Rören placeras i hela steriliseringsbehållaren. Efter autoklavering krossas glasets ampull för att frigöra mediet, och röret inkuberas vid 56 ° C, tillsammans med en positiv kontroll. Om sterilisering är otillräcklig kommer överlevande sporer att växa och göra buljongen gul. Om sterilisering är effektiv inaktiveras sporerna och buljongen förblir lila.

Verifieringsfrekvens

För närvarande finns det ingen strikt nationell standard när det gäller frekvensen av verifiering av autoklaveffektivitet. Laboratorier förväntas etablera sina egna verifieringsscheman och följa dem strikt. Med tanke på både användarvänlighet och tillförlitlighet för resultat rekommenderar vi att du använder indikatorband i kombination med biologiska indikatorrör, eftersom de erbjuder enkel drift och omfattande verifiering av steriliseringseffektivitet.

Anteckningar om sterilisering (krävs inte för vissa importerade helautomatiska autoklaver)
När du använder en högtrycks ångsterilisator är det avgörande att utvisa all kall luft inuti kammaren när ångan släpps. Först efter att all den kalla luften har tagits bort om avgasventilen stängs. Om någon luft kvarstår kan tryckmätaren indikera rätt tryck, men den faktiska temperaturen inuti kammaren kommer att komma till kort. Ju mer luft som behålls, desto större är skillnaden mellan tryck och temperatur, vilket kan leda till ofullständig sterilisering. (Detta observeras ofta under steriliseringen av fermenteringsmediet, där luftbubblor kvarstår i små styrrör - försök att uttömma den kalla luften mer grundligt.)